놀면서 공부하기

Annexin V 염색이란? – 세포사멸을 보는 형광 표지법

세포가 스스로 죽는 현상, 즉 세포사멸(apoptosis)은 생명 유지와 항상성 조절에 있어 매우 중요한 과정이에요. 이를 분석하고 측정하는 다양한 방법 중에서 가장 널리 사용되는 방법이 Annexin V 염색법이에요. 형광 유세포 분석(flow cytometry)이나 형광 현미경 이미징에 모두 적용할 수 있고, 세포사멸 초기 단계부터 감지할 수 있는 강력한 도구죠. Annexin V의 작용 원리 Annexin V는 35~36kDa 크기의 인지질 결합 단백질로, 칼슘(Ca²⁺) 의존적으로 음전하를 띤 인지질인 phosphatidylserine(PS)에 강한 친화력을 보여요. PS는 정상적인 건강한 세포에서는 세포막의 안쪽(세포질 쪽)에 존재하지만, 세포사멸이 시작되면 PS가 세포막 바깥쪽으로 이동하..

SYTOX Green 염색 – 죽은 세포를 표지하는 녹색 형광 염색제

세포 생존율 분석에서 가장 중요한 점 중 하나는 죽은 세포를 빠르고 정확하게 구별하는 것이에요. 살아있는 세포와 죽은 세포는 막 투과성의 차이를 보이기 때문에, 이를 활용한 염색법이 많이 사용되고 있죠. 오늘 소개할 SYTOX Green은 이러한 원리를 이용해 죽은 세포만 선택적으로 염색할 수 있는 강력한 형광 염색제예요.SYTOX Green의 작동 원리SYTOX Green은 살아있는 세포에는 들어갈 수 없지만, 막이 손상된 죽은 세포의 세포막은 쉽게 통과해요. 일단 세포 안으로 들어가면 핵산(DNA 또는 RNA)에 결합해 강력한 녹색 형광을 발산하게 돼요. 특히 이 염색제는 핵산에 결합했을 때 형광이 500배 이상 증가하므로, 살아있는 세포와 죽은 세포의 신호 차이가 매우 뚜렷하게 나타나요.SY..

PI 염색 기반 세포 생존율 측정법 - flow cytometry

유세포 분석(flow cytometry)은 세포의 크기, 복잡성, 단백질 발현뿐 아니라 세포의 생존 여부까지 정량적으로 파악할 수 있는 강력한 도구예요. 특히 약물 처리나 환경 변화에 따른 세포 반응을 확인할 때, 세포 생존율(cell viability)을 평가하는 과정은 매우 중요하죠. 이번 글에서는 유세포 분석에서 가장 널리 사용되는 Propidium Iodide(PI) 염색법을 중심으로 세포 생존율을 어떻게 측정하는지 소개해드릴게요.왜 세포 생존율 측정이 중요할까요?세포 실험에서 죽은 세포를 분석에 포함시키면, 비특이적인 항체 결합이나 형광 프로브의 비정상적 흡수로 인해 결과에 오류가 생길 수 있어요. 이런 이유로 유세포 분석 전에는 죽은 세포를 구별하고 제외하는 과정이 반드시 필요하죠...

DAPI와 Hoechst 공통점과 차이점 한번에 알아보기

세포핵을 형광으로 염색할 때 가장 많이 쓰이는 두 가지 염색제가 바로 DAPI와 Hoechst예요. 둘 다 파란색 형광을 내는 DNA 염색제지만, 구조와 특성에서 차이가 있기 때문에 실험 목적에 따라 적절한 선택이 필요해요. 이번 글에서는 DAPI와 Hoechst의 차이점과 공통점, 그리고 각각의 장단점을 정리해볼게요.DAPI 염색제의 특징DAPI는 4',6-diamidino-2-phenylindole이라는 이름을 가진 인공 합성 형광 염색제예요. 주로 이중가닥 DNA의 소수홈(minor groove)에 결합하며, A/T 염기쌍이 풍부한 영역에 높은 친화력을 보여줘요. 자외선(358nm)을 쬐면 약 461nm에서 파란 형광을 방출하기 때문에, 형광현미경을 활용한 세포핵 관찰에 많이 사용돼요.D..